Verletzung des Blutflusses verursacht 1a

Verletzung des Blutflusses verursacht 1a

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Verletzung des Blutflusses während der Schwangerschaft 1a Grad

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Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury. Click here for the english version. For other languages click here. Reperfusion nach Ischämie können weitere Schäden des Darms verstärken. Die Mechanismen der IR-Verletzungen sind komplex und kaum verstanden, Verletzung des Blutflusses verursacht 1a. Dies wird durch Induzieren von Ischämie in dem Bereich des distalen Ileums durch zeitliches Occludin erreichtg die peripheren und Terminalnebenzweige der A. Reperfusion für 1 Stunde oder 2 Stunden nach einer Verletzung führt zu reproduzierbaren Schädigung des Darms durch die histologische Analyse untersucht.

Die richtige Position der mikrovaskulären Clips ist für das Verfahren kritisch. Daher bietet der Videoclip eine detaillierte visuelle Schritt-für-Schritt-Beschreibung dieser Technik. Dieses Modell der intestinalen IR Verletzung kann die zellulären und molekularen Mechanismen der Schädigung und Regeneration zu Verletzung des Blutflusses verursacht 1a verwendet werden.

Der Darm ist sehr Salbe von Krampf Heparin Salbe auf Unterbrechung des Blutflusses, die Ischämie und epithelialen Schaden verursacht. Reperfusion nach Ischämie stellt Wiedersauerstoffversorgung des Gewebes und kann weiter Pathologie fördern. Intestinale IR Verletzungen, vor allem akute Mesenterialischämie, ist ein lebensbedrohlicher Zustandwas zu Morbidität und Mortalität 3.

Obwohl wenig verstanden wird intestinale Ischämie-Reperfusions IR Schädigung dachte mit Veränderungen in der Darmflora verbunden zu seinVerletzung des Blutflusses verursacht 1a, sowie die Produktion von reaktiven Sauerstoffspezies und inflammatorische Zytokine und Chemokine 1, Dies führt zur Aktivierung von sowohl innate und adaptive Immunmechanismendie eine Entzündung und Gewebeschädigung 1,7,8 fördern.

Tiermodelle sind von entscheidender Bedeutung für die Mechanismen der IR Verletzungs verstehen, da sie leicht Verstärkungs- und loss-of-function genetische Experimente ermöglichen.

Jedoch verschiedene Bereiche des Darmes haben unterschiedliche Verletzungsanfälligkeit. Tabelle 1 zeigt diese Inkonsistenzen in murine IR - Studien. Mild Schädigung des Epithels kann eine Stunde nach der Reperfusion gelöst werden, deshalb spezialisierte pathologische Metriken erforderlich sein können Unterschiede in der epithelialen Restitution zu finden.

Deshalb beschreiben wir die Einzelheiten des Verfahrens der intestinalen IR bei Mäusen, die ohne Mortalität in reproduzierbarer Verletzungen führt die Standardisierung dieser Technik in unserem Bereich zu fördern.

Please recommend JoVE to your librarian. Repräsentative Ergebnisse sind in diesem Abschnitt dargestellt. Grüne Pfeile zeigen die Position von zusätzlichen Clips Blutversorgung von Kollateralen zu blockieren. Abbildung 2 zeigt ein Beispiel einer Gewebekassette enthältRouladen aus con vorbereitettrol und ischämische Regionen des Ileums nach 1 Stunde von Ischämie, durch ein 1 Stunde Reperfusion. Beachten Sie die Farbdifferenz zwischen Kontrolle und ischämischem Gewebe.

Abbildung 3 zeigt repräsentative Hämatoxylin und Eosin - Färbung der Kontrolle und der ischämischen Bereiche des Ileum nach 1 Stunde von Ischämie oder 1 h durch eine 2 h Reperfusion Ischämie. Notieren Sie sich die schweren Schäden des Epithels nach 1 Stunde von Ischämie durch hämorrhagischen Zotten gekennzeichnet, Epithel denudement mit Teilablation der Krypten zu vervollständigen, und Immunzellinfiltration Stern. Kleine Schnitte in der Gekröse die A, Verletzung des Blutflusses verursacht 1a.

B mikrovaskuläre Clip - Anwendung mit Clip - Anbringvorrichtung. C Position der mikrovaskulären Clips auf A. Die Pfeile zeigen die ischämischen Bereich von Ileum durch Hämatoxylin gekennzeichnet. Die Entwicklung von Verletzung des Blutflusses verursacht 1a der intestinalen Verletzungen IR haben stark verbessert das Verständnis der Mechanismen der Gewebeverletzung und bei der Entwicklung von potentiellen therapeutischen Strategien Aided zu Gewebeschäden 7,9,11,34 minimieren.

Die kritischen Schritte dieses Protokolls sind die richtige Positionierung der mikrovaskulären Clips, richtige Timing der Ischämie und korrekte histologische Untersuchung des IR-Verletzung. Die Dauer der Ischämie ist kritisch für die nachfolgende epithelialen Schaden. Die typische Video Bein Krampfadern Behandlung ohne reproduzierbare IR Schädigung induzieren erforderlich Morbidität und Mortalität der Versuchsmäuse min durch eine h Reperfusion.

Verlängerte Perioden der Ischämie kann zu einer vollständigen Verlust des Epithels und erhöhter Mortalität. Zum Beispiel resultierte in einem Schweinemodell von jejunal Ischämie, 60 min Okklusion in teilweisem Verlust von villa Epithel, während Okklusion für min zum vollständigen Verlust der villus Epithel 35 geführt.

Obwohl Behandlung von Krampfadern Äpfel Zeit für die Reperfusion nach der Auswertung der Gewebeschädigung h Verletzung des Blutflusses verursacht 1a, längere Zeit 12 h wird für die Analyse der intestinalen Stammzellmobilisierung 36 erforderlich.

Die richtige Position der mikrovaskulären Krampfadern Bein Bewertungen ist auch entscheidend für die reproduzierbare IR-Verletzung. Jedoch variiert die genaue Position des Clips und die Analyse von verschiedenen Abschnitten des Darmes sowie verschiedene Methoden der Anästhesie zwischen diesen Untersuchungen, ist es schwierig zu reproduzieren siehe Tabelle 1 zu machen.

Daher wird Verletzung des Blutflusses verursacht 1a der vorliegenden Studie haben wir ein Protokoll konsistent IR Verletzung des terminalen Ileums zu induzieren, die leicht zu reproduzieren ist. Ein Beispiel für die Analyse der inflammatorischen Cytokin - Expression wird auf Abbildung 4 dargestellt. Es ist wichtigtrotz der hohen Reproduzierbarkeit und die Zugänglichkeit von IR Verletzung des Ileum zu beachtendass dieses Modell nicht alle klinischen Anzeichen einer Krankheit beim Menschen, in besonders chronischen Krankheitszuständen und Bedingungen mit teilweiser Verschluss der Arteria mesenterica superior zurückgelegt werden 9 9, Verletzung des Blutflusses verursacht 1a, Eine sorgfältige Auswahl des Tiermodells auf den menschlichen Zustand abhängig sucht kritisch.

Zusammenfassend beschreiben wir eine einfache und robuste Ausführung der intestinalen IR Verletzung, die verwendet werden können, die zellulären und molekularen Mechanismen der epithelialen Verletzungen und Regeneration zu studieren. Diese Arbeit wurde von russischen Science Foundation unterstützt wurde, gewähren keine.

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Vorbereitung für Chirurgie Bereiten Sie und chirurgische Instrumente zu sterilisieren. Stellen Sie sicher, dass das Isofluran Gasspül- Kanister richtig positioniert ist, um die Auslassöffnungen an der Unterseite des Behälters, um sicherzustellen, sind nicht in irgendeiner Weise blockiert oder verstopft, Verletzung des Blutflusses verursacht 1a.

Hornhautaustrocknungs, legen fad Augensalbe in die Augen zu verhindern. Abdeckung Betriebsbereich mit sterilem nicht-haftenden Unterlage mit Kochsalzlösung angefeuchtet ist. Isolieren Blinddarm und Ileum und setzen die A. Um die Scheinoperation durchzuführen, folgen Sie dem chirurgischen Eingriff bis 3. Wenden Sie keine Clips. Stattdessen halten das Gewebe feucht durch hinzugefügt warme saline wie in 3.

Obwohl die Position der Schiffe konservativ ist, könnte es zwischen Mäusen siehe Beispiele auf Abbildung 1 leichte Variationen. Verwenden Sie qualitativ hochwertige Behälter Clips. Tropfenweise 0,5 ml Heparin-Lösung auf den isolierten Darm hinzuzufügen. Stellen Sie sicher, dass bleibt Tücher während des gesamten Verfahrens Verletzung des Blutflusses verursacht 1a. Wenn Ischämie Verfahren korrekt durchgeführt wird, wird der ischämischen Region Wein in der Farbe rot in etwa 30 Minuten ändern.

Weiterhin Kochsalzlösung in die nicht-adhärenten pad anzuwenden Abdecken der Operationsstelle. Dann drücken Sie vorsichtig den Darm wieder in die Bauchhöhle Salzlösung angefeuchtete Wattestäbchen verwenden. Pflegen Mäuse in einem geheizten sauberen Käfig für die gewünschte Zeitdauer 30 min, 60 min, min bzw, Verletzung des Blutflusses verursacht 1a.

Überprüfen Tiere mindestens alle 30 min Stabilität zu gewährleisten. Öffnen Sie Bauchhöhle und sammeln das ischämische Darmgewebe zur weiteren Analyse. Ernte gesund normales Gewebe neben dem verletzten Gewebe als interne Kontrolle zu Konto für jede systemische Reaktion auf eine Verletzung.

Diese Kontrolle ist besser geeignet als die Scheinkontrollmäuse betrieben, weil Verletzung des Blutflusses verursacht 1a Mäusen keine systemische Reaktion auf IR-induzierte Schädigung erleiden. Wenn eine Probe des Darmes für die Genexpressionsanalyse erforderlich ist, schneiden Sie ein 1,5 mm-Fragment in Längsrichtung, und verwenden Sie das restliche Stück für die histologische Analyse.

Für die histologische Analyse, bereiten eine Schweizer Rolle ein Paar Zangen mit dem intest rollenine. Fix Gewebe in Formalin für mindestens 24 Stunden. Einbetten von in Paraffin, schneiden 5 um - Schnitte und flecken mit Hämatoxylin und Eosin ein Standardprotokoll Abbildung 3 verwendet wird.

Wählen Sie eine geeignete Scoring - Methode. Berechnen Sie den durchschnittlichen Grad von jedem Abschnitt von Partituren blind erhalten.

Occlusion von Sicherheiten circulation am proximalen und distalen Bereichen. Normal Schleimhaut 13,17,18 Grad 1: Subepitheliales Raum an der Villi Spitze Grade 2: Epithelial Anheben entlang der Verletzung des Blutflusses verursacht 1a villous Grad 4: Denuded Zotten Grad 5: Verlust von Zottengewebe Klasse 6:


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